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动物血清的保存方法有哪些?@本生快讯
点击次数:769发布时间:2020/6/12
动物血清的保存方法有哪些?@本生快讯
动物血清对培养中的细胞起到某些保护作用,在内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶、血清中含有抗蛋白酶成分起到中和作用。不仅如此,血清还含有些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用。可以说,动物血清的用途是特别的广泛!
动物血清保存方法:
1,需求长时间保存的血清有必要贮存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中,4℃冰箱中保存时间切勿超越1个月,由于血清结冰时体积会添加约10%,因而,血清在冻入低温冰箱,有必要预留必定体积空间,否则易发作污染或玻璃瓶冻裂。
2,热灭活是指56℃, 30分钟加热已彻底冻结的血清,加热过程中须规矩摇晃均匀,此热处理的意图是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非有必要,般不主张作此热处理,由于热处理会形成血清沉积物明显增多,并且还会影响血清的质量,补体参加反响有:细胞毒效果, 滑润肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板开释组胺, 增强吞噬效果, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发作化学趋化和活化。
3,瓶装血清冻结需选用逐渐冻结法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温,待全部溶解后再分装,在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(当心勿形成气泡),使温度与成分均,削减沉积的发作,切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结,这样因温度改动太大,简单形成蛋白质凝聚而呈现沉积。
4,般厂商供给的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清参加培养液内同过滤,切勿直接过滤血清。
5,动物血清中的沉积物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及冻结后血清中纤维蛋白形成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理, 显微镜下"小黑点":通过热处理过的血清,沉积物的形成会明显增多,有些沉积物在显微镜下调查象"小黑点",常误认为血清受污染,般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果置疑血清质量,则应立即停止使用,替换另批号的血清。
6,切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,起血清中的有效成分会破会而影响血清质量。