泉州市睿信生物科技有限公司是集研发、生产、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司，目前可提供各种抗体、免疫学试剂盒、生化试剂、分子生物学试剂等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。依托湖北武汉、江苏南京、福建泉州三大研发及销售 ，布局全国市场。

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常见问题  兔溶菌酶(LYS)elisa试剂盒

   建立巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)IgG定量ELISA检测方法,并进行初步应用.方法 用CMVIgG(50 U/ml)标准品建立CMV IgG ELISA定量检测方法,确定该方法的*佳线性范围；制备室内质控血清并进行标定.对该方法进行重复性、中间精密性、准确性、特异性验证,并与 Dia.Pro CMV IgG ELISA试剂盒进行比较.用建立的ELISA法检测689人份健康献浆员血浆的CMV IgG抗体效价.结果 建立的CMV IgG定量ELISA检测方法的*佳线性范围为0.000 78～0.05U/ml;制备的室内质控血清的抗体效价为(5.67±0.55)U/ml;重复性试验检测结果的变异系数为4.6％～9.8％,中间精密 性试验检测结果的变异系数为9.7％～10.6％;该方法检测3个浓度标准品的回收率为107.01％～112.97％；样品稀释液和血清中的其他一些干 扰因素对检测结果影响较小；该方法与Dia.Pro CMV IgG ELISA试剂盒检测血浆样品的相关系数r=0.81.该方法检测689人份健康献浆员血浆样品的CMV IgG抗体效价≥10U/ml的占30.8％.结论 建立的CMV IgG定量ELISA检测方法操作简便,精密性良好,特异性强,可用于人血浆中CMV IgG的定量检测.建立人免疫球蛋白类制品中免疫球蛋白A(IgA)含量测定的酶联免疫(ELISA)方法。方法:使用筛选出的ELISA检测试剂盒和IgA标准品,建立IgA含量测定的ELISA方法并进行方法学验证,使用验证的方法对来自不同企业的22批静注人免疫球蛋白(pH 4)中IgA含量进行测定。结果:建立的方法在1.562 5×10~(-3)~2.5×10~(-4) IU·mL~(-1)范围内线性良好(r=0.996 3);与IgG1类单抗药物未显示交叉反应;定量限为2.167×10~(-4) IU;含不同辅料的2种处方平均加标回收率分别为102.2%和98.5%;重复性和中间精密度RSD均小于10%;高、中、低浓度样品使用不同批号试剂盒测定结果 RSD均小于10%。由于生产工艺不同,各家企业所生产的静注人免疫球蛋白(pH 4)中IgA含量各不相同,经纯化的产品IgA含量更低。结论:该检测方法具有快速、灵敏、操作简便等特点,可用于人免疫球蛋白类制品的质量控制。建立人免疫球蛋白类制品中免疫球蛋白A(IgA)含量测定的酶联免疫(ELISA)检测方法。方法:选择合适的ELISA检测试剂盒,结合使用标准品,建立了IgA含量测定的ELISA检测方法并对方法进行了方法学验证,*后应用此方法对来自不同企业的64批静注人免疫球蛋白(pH4)中的IgA含量进行了测定。结果:该方法的线性范围是1.5625×10~(-3)~25×10~(-3)IU/ml,标准曲线相关系数r=0.9963;平均加样回收率为102.1%(处方1)和98.5%(处方2);定量限为2.046×10~(-4)IU;精密度好(RSD10%);专属性强,与IgGl类单抗药物无交叉反应。由于生产工艺不同,各家企业所生产的静注人免疫球蛋白(pH4)中IgA含量各不相同。结论:建立了IgA含量测定的ELISA方法。 应用抗人类免疫球蛋白 IgG 单克隆抗体和斑点(Dot)-ELISA 方法,来检测人类血清与其他体液的免疫球蛋白 IgG。方法：本文所描述的是一种高效的建立混合细胞株分泌单克隆抗 IgG 的方法。用人类免疫球蛋白 IgC 免疫 BALB/C 老鼠。免疫的脾细胞与 SP2/O 鼠的骨髓瘤细胞融合。



应用领域  兔溶菌酶(LYS)elisa试剂盒
   37℃温育10 ～15天后,应用 ELISA 实验,每一孔的培养基用血细胞凝集来检验抗体。建立混合细胞株分泌单克隆抗 IgG 抗体,分别用 ELISA,ELISA-抑制和 Dot-ELISA 方法来检测评估单克隆抗 IgG 抗体,当制备好混合细胞株后,则可分泌高效价和特异的抗 IgG 免疫单克隆抗体。国产与进口人肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)Ig G抗体ELISA检测试剂盒的性能差异。方法采用国产和进口ELISA试剂盒分别检测50例HFRS疫苗接种者血清样本中抗人HFRS Ig G抗体含量,分析比较2种ELISA试剂盒的一致性、灵敏性、精密度以及方法学等的差异。结果 2种ELISA试剂盒的精密度良好,批内变异系数均5%;2种试剂阳性一致率为100%,阴性一致率为20%,相似率为60%;灵敏性检测结果显示,2种ELISA试剂盒的灵敏性差异较大(P0.05),国产ELISA试剂盒的灵敏度约是进口ELISA试剂盒的5倍。结论国产人HFRS Ig G抗体ELISA检测试剂盒灵敏性好,进口ELISA试剂盒特异性好,国产和进口ELISA试剂盒的精密度均良好,在实际应用中应根据具体情况合理选用。人类免疫球蛋白同种异型包括 IgG 重链上的 Gm 系统。现已发现18个 Gm 因子。其中, 存在于 IgG3亚类上的 G3m(16)因子*早由 Martensson 等发现,以后的研究表明 G3m(16) 因子的分布有两个特点：(1)除人类外,它几乎不存在于其他灵长类动物,提示它具有高度的种属特异性；(2)在人类,它主要存在于 Mongoloid,Ainu 及 San人,是这些人种重要的遗传标记。因此,G3m(16)因子作为人类的一种体质特征,可用于研究人类的进化,种族特征 对IgG的检测方法———紫外分光光度法和免疫单扩散方法进行比较。方法:采用紫外分光光度法和免疫单扩散法对样品进行IgG含量测定,然后对结果进行分析。结果:两种方法测定的结果差异无显著性(P>0.05)。紫外分光法操作更方便、快捷,准确。免疫球蛋白IgG3恒定区(IGHG3)和触珠蛋白(HPT)与肺结核病的相关性.方法 采用ELISA法检测IGHG3和HPT在50例初治肺结核病患者和36例健康对照者血清中的含量;并收集肺结核病患者临床检测资料,包括血浆纤维蛋白原(FIB)、PT、APTT、TT、血糖、C反应蛋白(CRP)、TG等检测指标,分析差异情况以及IGHG3和HPT与患者临床检测结果的相关性.结果 肺结核病患者IGHG3、HPT含量明显高于健康对照组(均P＜0.01).肺结核病患者FIB、APTT、CRP值与正常范围有明显差异(均P＜0.05).IGHG3含量与CRP含量呈正相关(r=0.372,P=0.014),HPT含量与肺结核病患者空洞型病变呈正相关(r=0.28,P=0.04).通过逻辑回归将IGHG3和HPT组成蛋白质模型,ROC曲线结果显示该模型鉴别肺结核病和健康对照组的灵敏度为90.90％,特异度为80.80％,AUC值为0.866.结论 IGHG3和HPT可能是肺结核病潜在生物标志物.建立高效亲和色谱(HPAC)法测定静注人免疫球蛋白中IgG的含量。方法用HiTrap Protein G HP亲和色谱柱,以0.05 mol/L磷酸盐缓冲液和0.07 mol/L的甘氨酸-盐酸盐缓冲液为流动相,流速为0.4 ml/min,检测波长为280 nm。结果IgG含量在0.25~2.0mg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率为96.6%,相对标准偏差值(RSD)=2.3%(n=9)。






适用范围  兔溶菌酶(LYS)elisa试剂盒
结论本方法简便、快速、重现性好,可用于IgG的含量测定。建立IgG3酶联免疫分析(ELISA)方法,探讨IgG3在炎症性疾病患者血清中的水平变化。方法:用兔抗人IgG3的多克隆抗体包被成固相酶标板,以识别结合待测标本中的IgG3,再用此多克隆抗体标记生物素(B io-Ab),用亲和素标记辣根过氧化物酶(HRP-A),向固相酶标板中加入标准品或待测品,反应、洗涤后,加入B io-Ab,反应、洗涤后,加入HRP-A,反应、洗涤后,酶标板上形成Ab-Ag-Ab-B io-A-HRP复合物,加酶底物显色,用酶标仪在相应波长下测定光密度(OD值),根据标准曲线,计算出待测标本中的IgG3含量。结果:该法测定范围为(1.875~60)ng/m l。建立IgG3酶联免疫分析(ELISA)方法,探讨IgG3在炎症性疾病患者血清中的水平变化。方法:用兔抗人IgG3的多克隆抗体包被成固相酶标板,以识别结合待测标本中的IgG3,再用此多克隆抗体标记生物素(B io-Ab),用亲和素标记辣根过氧化物酶(HRP-A),向固相酶标板中加入标准品或待测品,反应、洗涤后,加入B io-Ab,反应、洗涤后,加入HRP-A,反应、洗涤后,酶标板上形成Ab-Ag-Ab-B io-A-HRP复合物,加酶底物显色,用酶标仪在相应波长下测定光密度(OD值),根据标准曲线,计算出待测标本中的IgG3含量。结果:该法测定范围为(1.875~60)ng/m l,生物分子标记的荧光检测技术已广泛应用于生物学检测和疾病诊断。实验利用反向微乳液技术,制备出Ru(bpy)3Cl2掺杂SiO2荧光纳米粒子。IgG的检测是基于IgG和荧光纳米颗粒标记的羊抗人IgG的特异性结合。实验中,IgG检测的线性范围为1~100 ng/mL,检出限达到0.3ng/mL,对30 ng/mL人IgG进行11次检测,相对标准偏差为2.2%。实验结果表明,该检测新方法具有检测灵敏度高、操作简单和重复性好。甲泼尼龙琥珀酸钠联合人免疫球蛋白(pH4)对小儿急性播散性脑脊髓炎(ADEM)免疫功能的影响。方法选取2016年2月—2017年3月我院诊治的ADEM患儿94例,采用随机数字表法将患儿分为治疗组与对照组,各47例。在常规治疗基础上,对照组单纯应用甲泼尼龙琥珀酸钠治疗,治疗组采用甲泼尼龙琥珀酸钠联合人免疫球蛋白治疗。比较两组免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)水平、临床疗效,发热、意识障碍等临床症状持续时间,头痛、水肿、咳嗽等不良反应发生情况。结果治疗前,两组IgA、IgE、IgG、IgM比较,差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后,治疗组IgE、IgG、IgM水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；治疗组临床总有效率为95.74%,明显高于对照组的80.85%(P<0.05),发热等临床症状持续时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)；治疗组不良反应发生率为17.02%,略低于对照组的21.28%,差异无统计学意义(χ~2=0.275,P>0.05)。结论应用甲泼尼龙琥珀酸钠联合pH4能够显著增强ADEM患儿免疫功能,提高临床疗效,有助于快速缓解患儿痛苦,从而提高治疗依从性。儿童反复呼吸道感染（recurrent respiratory tract infections,RRTI）与免疫球蛋白（Ig）及IgG亚类的相关性。方法 依据RRTI的诊断标准,收集本院2014年3月-2015年3月诊断为RRTI的患儿组80例和不同年龄对照组60例,检测血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和IgG亚类（G1、G2、G3、G4）。结果 各年龄组患儿与正常组相比,0～2岁患儿：IgG、IgA、IgM差异无统计学意义（P〉0.05）,IgG4明显降低（P〈0.05）;3～5岁患儿：IgG、IgM差异无统计学意义（P〉0.05）,IgA明显降低（P〈0.05）,IgG2、IgG4明显降低（P〈0.05）;6～12岁患儿：IgG、IgA、IgM差异无统计学意义（P〉0.05）,IgG1、IgG2、IgG3、IgG4差异无统计学意义（P〉0.05）。且随着年龄增长IgG、IgA有明显增长的趋势,IgM变化不明显。RRTI儿童存在IgG亚类缺陷,检出率42.5%,其中单项缺陷以IgG4为主占35%,联合缺陷以IgG2、IgG4为主占41%。结论 RRTI儿童存在免疫球蛋白IgG亚类缺陷,临床应重视IgG亚类检测,IgG2、IgG4缺陷可能是儿童RRTI的发病原因,它能更敏感地反映RRTI患儿的免疫功能。



注意事项 兔溶菌酶(LYS)elisa试剂盒
为了进一步补充和完善我国静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)(pH4)制品的质量评价体系,分别建立IVIG中抗体的多样性和Fc段(Fragment crystallizable region,Fc region)生物活性检测方法;并利用上述建立的方法,开展我国主要血液制品厂家IVIG制品的抗体多样性及Fc段功能的研究。本研究为进一步保障我国IVIG制品的质量提供技术支撑与数据基础。方法:1、利用双向电泳技术结合蛋白免疫印迹方法,以大肠杆菌0157:H7总蛋白为抗原,开展我国IVIG制品抗体谱的多样性研究,并利用质谱方法对IVIG的目标抗原进行鉴定;2、优化药典载录的IVIG Fc段生物学活性(激活补体活性)检测方法,开展我国IVIG制品Fc段激活补体活性的研究;3、建立基于流式细胞术的IVIG Fc段生物学活性(结合受体活性)分析方法,开展我国IVIG制品Fc段结合受体活性的研究;利用高效液相色谱方法分析IVIG中IgG二聚体含量,比较IgG二聚体含量与Fc段结合受体活性的关系。结果:本研究成功建立了稳定性良好的IVIG抗体谱及Fc段生物学活性评价方法,并利用该方法对国内外厂家IVIG制品分析,结果如下:1、国内8个厂家IVIG制品识别反应的抗原蛋白点为156±48个,而国外Octapharma公司的IVIG识别反应的抗原点为124个。蛋白表面疏水性是蛋白质的重要特性,对于维持蛋白质的稳定构象及生物活性有着重要作用,同时又是疏水作用为主的层析分离蛋白质方法的重要依据。了解蛋白质在不同条件下表面疏水特性的变化,有助于理解其结构变化和生理活性,对于优化蛋白分离过程也有指导意义。本文利用荧光探针法和疏水相互作用层析(HIC)法,探究不同因素对蛋白表面疏水性的影响,得到一些规律性认识。主要结果如下： 首先以8-苯氨基-1-萘磺酸铵盐(ANS)为荧光探针,优选了测定体系的pH值和ANS浓度,测定蛋白质的表面疏水性指数S0,考察了温度、盐、变性剂、辛酸钠(NaCA)等对牛血清白蛋白(BSA)、牛免疫球蛋白(bIgG) So的影响。发现温度对BSA和bIgG表面疏水性的影响呈现相反的规律。不同盐对蛋白表面疏水性的影响与相关离子的Hofmeister序列位置相关,稳液盐和中性盐存在时蛋白质的S0值大于离液盐条件下的S0值。BSA和bIgG的表面疏水性受十二烷基磺酸钠(SDS)的影响存在较大差异。盐酸胍浓度升高,BSA的S0值明显减小,而bIgG的S0值先增大后减小。NaCA浓度提高,BSA的S0值逐渐减小,而bIgG的S0值则几乎没有变化。 运用荧光光谱法进一步分析荧光探针-蛋白质的结合作用,比较多种数据处理方法。