联系方式:
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本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 (产品说明书请咨询销售)
大鼠(Rat)肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA 检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被肿瘤坏死因子α
(TNF-α)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻
底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*
终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波
长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000
转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,
在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这
属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5
倍,*终结果乘以 5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
公司主营产品:ELISA 试剂盒,动物血制品,标准品,试剂,染色液,也可代理进口品牌,还有代测服务,欢迎致电咨询
1滁州仕诺达生物科技有限公司
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2
试剂盒组成
名称
96 孔配置
48 孔配置
备注
微孔酶标板
12 孔×8 条
12 孔×4 条
无
标准品
0.3mL*6 管
0.3mL*6 管
无
样本稀释液
6mL
3mL
无
检测抗体-HRP
10mL
5mL
无
20×洗涤缓冲液
25mL
15mL
按说明书进行稀释
底物 A
6mL
3mL
无
底物 B
6mL
3mL
无
终止液
6mL
3mL
无
封板膜
2 张
2 张
无
说明书
1 份
1 份
无
自封袋
1 个
1 个
无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、20、40、80、160、320 pg/mL
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍
干,如此洗板 5 次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
操作步骤
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100
μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,
如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出
标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。滁州仕诺达生物科技有限公司
公司主营产品:ELISA 试剂盒,动物血制品,标准品,试剂,染色液,也可代理进口品牌,还有代测服务,欢迎致电咨询
3
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于 0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于 1.0 pg/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 个月
免责声明
1.
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验
者承担,本公司概不负责。
2.
严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
大鼠(Rat)肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA 检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被肿瘤坏死因子α
(TNF-α)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻
底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*
终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波
长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000
转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,
在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这
属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5
倍,*终结果乘以 5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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12 孔×8 条
12 孔×4 条
无
标准品
0.3mL*6 管
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无
样本稀释液
6mL
3mL
无
检测抗体-HRP
10mL
5mL
无
20×洗涤缓冲液
25mL
15mL
按说明书进行稀释
底物 A
6mL
3mL
无
底物 B
6mL
3mL
无
终止液
6mL
3mL
无
封板膜
2 张
2 张
无
说明书
1 份
1 份
无
自封袋
1 个
1 个
无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、20、40、80、160、320 pg/mL
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍
干,如此洗板 5 次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
操作步骤
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100
μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,
如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出
标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。滁州仕诺达生物科技有限公司
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3
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于 0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于 1.0 pg/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 个月
免责声明
1.
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验
者承担,本公司概不负责。
2.
严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
人酪氨酸酶(Tyr)elisa试剂盒@*新新闻动态
人酪氨酸酶(Tyr)
elisa试剂盒@
*新新闻动态人酪氨酸酶(Tyr)
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*新新闻动态公司介绍滁州仕诺达生物科技有限公司(Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.)位于滁州定远,注册资本为贰佰万元,
是一家以技术开发、转让、销售及咨询服务为一体的生物科技有限公司,公司主要研发销售生物试剂,为全球科研客户提供优质的产品和技术服务。
公司主营产品包括:标准品、染色液、elisa试剂盒、动物血制品、试剂、抑制剂、酶相关试剂以及仪器设备等
代理品牌经销品牌:Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉丁(未提及品牌,本公司也可以代买)
合作单位合作单位(学校):中国人民解放军军事医学研究院、北京中医药大学、上海中医药大学、江西中医药大学、广州中医药大学、河海大学、北京脑研究中心等等
售后服务公司以“产品质量,服务至上”为企业宗旨,秉承友好共赢的合作理念,立志于为科研界老师提供我们力所能及的帮助。
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