本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断（产说明书请咨询销售）

大鼠（Rat）肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA 检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被肿瘤坏死因子α

（TNF-α）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻

底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成

终的黄色。颜色的深浅和样中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关。用酶标仪在450nm 波

长下测定吸光度（OD 值），计算样浓度。

样收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000

转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，

在室温下解冻并确保样均匀地充分解冻。

自备物

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这

属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 浓度为 0 的 S0 号标准即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释 5

倍，终结果乘以 5 才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用充分摇匀。

公司主营产：ELISA试剂盒，动物血制，标准，试剂，染色液，也可代理进口，还有代测服务，欢迎致电咨询

1滁州仕诺达生物科技有限公司

公司主营产：ELISA试剂盒，动物血制，标准，试剂，染色液，也可代理进口，还有代测服务，欢迎致电咨询

2

试剂盒组成

名称

96 孔配置

48 孔配置

备注

微孔酶标板

12 孔×8 条

12 孔×4 条

无

标准

0.3mL*6 管

0.3mL*6 管

无

样本稀释液

6mL

3mL

无

检测抗体-HRP

10mL

5mL

无

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物 A

6mL

3mL

无

底物 B

6mL

3mL

无

终止液

6mL

3mL

无

封板膜

2 张

2 张

无

说明书

1 份

1 份

无

自封袋

1 个

1 个

无

注：标准（S0-S5）浓度依次为：0、20、40、80、160、320 pg/mL

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍

干，如此洗板 5 次。

2. 自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

操作步骤

1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

2. 设置标准孔和样本孔，标准孔各加不同浓度的标准 50μL；

3. 样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100

μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，

如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

结果判断

绘制标准曲线：在 Excel 工作表中，以标准浓度作横坐标，对应 OD 值作纵坐标，绘制出

标准线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。滁州仕诺达生物科技有限公司

公司主营产：ELISA试剂盒，动物血制，标准，试剂，染色液，也可代理进口，还有代测服务，欢迎致电咨询

3

试剂盒性能

1. 准确性：标准线性回归与预期浓度相关系数 R 值，大于等于 0.9900。

2. 灵敏度：低检测浓度小于 1.0 pg/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于 15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6 个月

免责声明

1.

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的切后果，由实验

者承担，本公司概不负责。

2.

严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

大鼠（Rat）肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA 检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被肿瘤坏死因子α

（TNF-α）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻

底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成

终的黄色。颜色的深浅和样中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关。用酶标仪在450nm 波

长下测定吸光度（OD 值），计算样浓度。

样收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000

转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，

在室温下解冻并确保样均匀地充分解冻。

自备物

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这

属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 浓度为 0 的 S0 号标准即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释 5

倍，终结果乘以 5 才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用充分摇匀。

公司主营产：ELISA试剂盒，动物血制，标准，试剂，染色液，也可代理进口，还有代测服务，欢迎致电咨询

1滁州仕诺达生物科技有限公司

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2

试剂盒组成

名称

96 孔配置

48 孔配置

备注

微孔酶标板

12 孔×8 条

12 孔×4 条

无

标准

0.3mL*6 管

0.3mL*6 管

无

样本稀释液

6mL

3mL

无

检测抗体-HRP

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍

干，如此洗板 5 次。

2. 自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

操作步骤

1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

2. 设置标准孔和样本孔，标准孔各加不同浓度的标准 50μL；

3. 样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100

μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，

如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

结果判断

绘制标准曲线：在 Excel 工作表中，以标准浓度作横坐标，对应 OD 值作纵坐标，绘制出

标准线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。滁州仕诺达生物科技有限公司

公司主营产：ELISA试剂盒，动物血制，标准，试剂，染色液，也可代理进口，还有代测服务，欢迎致电咨询

3

试剂盒性能

1. 准确性：标准线性回归与预期浓度相关系数 R 值，大于等于 0.9900。

2. 灵敏度：低检测浓度小于 1.0 pg/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于 15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6 个月

免责声明

1.

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的切后果，由实验

者承担，本公司概不负责。

2.

严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa试剂盒@新新闻动态
大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒@新新闻动态
大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒@新新闻动态


公司介绍滁州仕诺达生物科技有限公司（Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.）位于滁州定远，注册资本为贰佰万元，
是家以技术开发、转让、销售及咨询服务为体的生物科技有限公司，公司主要研发销售生物试剂，为全球科研客户提供优质的产品和技术服务。

公司主营产品包括：标准品、染色液、elisa试剂盒、动物血制品、试剂、抑制剂、酶相关试剂以及仪器设备等

代理品牌经销品牌：Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉丁（未提及品牌，本公司也可以代买）

合作单位合作单位（学校）：中人民解放军军事医学研究院、北京中医药大学、上海中医药大学、江西中医药大学、广州中医药大学、河海大学、北京脑研究中心等等

售后服务公司以“产品质量，服务至上”为企业宗旨，秉承友好共赢的合作理念，立志于为科研界老师提供我们力所能及的帮助。
如果您对我公司的产品及服务有兴趣，期待您给我们个机会在线留言

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