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可见分光光度法
正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-CL主要来源于土壤微生物,S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
测定原理:
采用3.5-二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:甲苯 10mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;
加样表和测定步骤:
| 对照管 | 测定管 |
风干土样(g) | 0.25 | 0.25 |
试剂一(μL) | 125 | 125 |
| 煮沸15min(盖紧) | 振荡混匀,室温放置15min |
试剂二(μL ) | 250 | 250 |
试剂三(μL ) | 1000 | 1000 |
蒸馏水(μL ) | 250 | 250 |
振荡混匀,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(盖紧,防止水分散失),得糖化液 | ||
糖化液(μL) | 50 | 50 |
试剂四(μL) | 150 | 150 |
混匀, 沸水浴中煮沸显色15min(盖紧,防止水分散失),冷却 | ||
蒸馏水(μL) | 1050 | 1050 |
混匀,550nm 处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管 |