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详细内容
微量法
注意:正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
产品内容:
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存;临用前加入29.7mL 蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入1mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体×1 瓶,4℃保存。
产品说明:
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2 清除系统中具有重要作用。
H2O2 在240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT 活性的高低。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV板)和蒸馏水
操作步骤:
一、样品处理:
新鲜土样自然风干或37 度烘箱风干,过30~50 目筛。
二、测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至240nm,蒸馏水调零。
2、 加样表
试剂名称 | 测定管 | 无基质管 | 无土管 |
风干土样(g) | 0.03 | 0.03 |
|
试剂一(μL) | 260 |
| 260 |
双蒸水(μL) |
| 260 |
|
25℃振荡培养 20min | |||
试剂二(μL) | 10 | 10 | 10 |
混匀8000g,25℃离心5min,取全部上清 | |||
试剂三(μL) | 30 | 30 | 30 |
混匀,取200uL 至微量石英比色皿或96 孔板中,240nm 处记录各管吸光值A。
注意:每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。