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可见分光光度法
产品内容:
试剂一:液体60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入100uL试剂七使粉剂润湿,然后加入20mL试剂一,转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用;
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入50mL蒸馏水充分溶解待用;
试剂五:液体10mL×1 瓶,4℃保存;
试剂六:液体1.5mL×1 支,0.05mg/mL标准酪氨酸溶液,4℃保存;
试剂七:液体1.5mL×1 支,4℃保存;
产品说明:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源。S-ACPT在酸性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
酸性条件下,S-ACPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。
所需仪器及设备:
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步骤:
一、测定操作:
1、 分光光度计预热30min 以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。
2、 试剂二、三和四40℃水浴10min。
3、 样本测定:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | |||
风干土样(g) | 0.02 | 0.02 | |||
试剂一(μL) | 100 | 300 | |||
试剂三(μL) | 200 |
| |||
混匀,40℃水浴30min,振荡5-6 次,使土样与反应液充分接触 | |||||
试剂二(μL) | 100 | 100 | |||
混匀,10000rpm 室温离心10min,取上清液 | |||||
| 测定管 | 对照管 | 标准管 | ||
上清液(μL) | 150 | 150 |
| ||
试剂六(μL) |
|
| 150 | ||
试剂四(μL) | 700 | 700 | 700 | ||
试剂五(μL) | 150 | 150 | 150 |
混匀,40℃水浴20min,680nm 下读取各管吸光值A
注意:标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。