产品展示
优质供应
详细内容
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-AI在pH为4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶。
测定原理:
S-AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与AI活性成正比。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入25mL试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃
保存;
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;
测定步骤和加样表:
试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 |
试剂一 |
| 800 |
试剂二 | 800 |
|
混匀, 37℃准确水浴 30min,95℃水浴 10min 左右(盖紧,以防水分散失),流水冷却, 充分混匀(以保证浓度不变),10000g25℃离心 10min,取上清液 | ||
上清液 | 700 | 700 |
试剂三 | 350 | 350 |
混匀,95℃水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀,510nm 处,蒸馏水调零,记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数),ΔA=A测定-A对照。