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可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
镁是多种酶的激活剂,如磷酸酶、肌酸激酶、己糖激酶和羧化酶等。镁也是组成DNA、RNA及核糖体大分子结构所必需的元素。镁是维持正常神经和肌肉功能的重要元素。血清镁浓度偏离正常值,与某些肾脏和内分泌疾病等相关。
测定原理:
镁离子在碱性介质中氢氧化成胶体粒子,进一步与达旦黄结合后呈橘红色,在一定范围内,540nm吸光度与镁离子浓度成正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体×1 瓶,4℃保存。
标准液:液体×1 支,0.2 mmol/L 镁标准液,4℃保存。
测定操作:
1. 分光光度计预热30min,调节波长到540nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取EP管,加入600μL蒸馏水,100μL试剂一,混匀;进入100μL试剂二,混匀;加入200μL试剂三,混匀。静置5min后于540nm测定吸光度,记为A空白管。
3. 标准管:取EP管,加入50μL标准液,550μL蒸馏水,100μL试剂一,混匀;进入100μL试剂二,混匀;加入200μL试剂三,混匀。静置5min后于540nm测定吸光度,记为A标准管。
4. 测定管:加入50μL血清,550μL蒸馏水,100μL试剂一,混匀;进入100μL试剂二,混匀;加入200μL试剂三,混匀。静置5min后于540nm定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。