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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
Hg2+是水体中重要有毒重金属离子，易被生物体吸收并且积累，能够通过食物链进一步传递，从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。
测定原理：
水样经消化后，在酸性环境中，Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物，溶于三氯甲烷，在490nm测定吸光度，即可计算Hg2+含量。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、可调式移液枪、 浓硫酸、三氯甲烷和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加蒸馏水2mL充分溶解。
试剂四：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂五：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。加三氯甲烷（自备）50mL充分溶解。
标准品：液体×1 瓶，4nmol/mL Hg2+，室温保存。
水样中汞离子检测：
1. 消化
（1）水样消化：取带盖管，依次加入1mL水样，100μL 浓硫酸（自备），800μL试剂一，
混匀后盖紧，置于40℃水浴中消化24h。
（2）标准品消化：取带盖管，依次加入100μL标准品，900μL蒸馏水，100μL浓硫酸，800μL试剂一，混匀后盖紧，置于40℃水浴中消化24h。
2. 取出各管，室温放置约20min，使之冷却。然后加入160μL试剂二，盖紧后充分震荡，直到无色。开盖静置30min，期间摇荡数次，使其中气体溢出。
3. 加入800μL蒸馏水，40μL试剂三；盖紧后混匀后，静置5min；加入200μL试剂四，充
分震荡后静置分层。
4. 取100μL移液枪，排气后，沿管壁小心插入下层，吸取100μL下层液体，加入到EP管中，再加入1mL试剂五，盖紧后充分震荡，直到无色。
5. 静置分层后，取1000μL移液枪，调节刻度到700μL，排气后沿管壁小心插入下层，吸取700μL下层液体，加入1mL玻璃比色皿，于490nm 处比色，记录各管吸光值。
注意：标准管只需测定一次。
