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详细内容
可见分光光度法
注意:正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
产品内容:
试剂一:液体10mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体10mL×1 瓶 ,4℃保存。
产品说明:
山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是糖运输形式,而且与生物抗逆性和食物风味密切相关。因此,在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含量变化。
山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物,在655nm 波长有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、山梨醇的提取:
按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.2g 组织,加入2mL蒸馏水),研磨成匀浆, 95℃水浴10 分钟(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心10min,取上清液待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min 以上,调节波长至655nm,蒸馏水调零。
2、加样表(在EP 管中依次加入下列试剂):
试剂(μL) | 空白管 | 测定管 |
试剂一 | 150 | 150 |
试剂二 | 140 | 140 |
样本 |
| 1000 |
蒸馏水 | 1000 |
|
混匀后室温静置15min,8000g,25℃离心10min,取上清液测655nm 下吸光值A,计算ΔA=A测定管-A 空白管。空白管只要做一管。