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可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
CL（EC 3.2.1.4）存在于细菌、真菌和动物体内，能够催化纤维素降解，是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
测定原理：
采用3.5－二硝基水杨酸法测定CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
样品测定的准备：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议 500 万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至550nm，蒸馏水调零。
2、加样表（在 EP 管中依次加入下列试剂）：
| 试剂名称（μL） | 对照管 | 测定管 |
| 试剂一 | 50 | 50 |
| 试剂二 | 200 | 200 |
| 蒸馏水 | 50 | 50 |
| 样本 |
| 50 |
| 煮沸的样本 | 50 |
|
| 混匀，40℃准确水浴 30min，取出后立即放入沸水中煮沸 15min,得糖化液 | ||
| 糖化液 | 50 | 50 |
| 试剂三 | 150 | 150 |
| 混匀， 沸水浴中煮沸显色 15min，冷却 | ||
| 蒸馏水 | 1050 | 1050 |
混匀，测550nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。
