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可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖，不仅与细胞壁的松弛或加固有关，而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。
测定原理：
α-GC 分解对-硝基苯-α-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在 400nm有吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GC 活性。
自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 10mL 蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。
2、 加样表
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 试剂一 | 400 |
|
| 试剂二 | 500 | 500 |
| 样本 | 100 | 100 |
| 充分混匀，放入 37℃准确水浴 30min 后，立即放入 95℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变） | ||
| 试剂一 |
| 400 |
| 充分混匀，8000g，4℃，离心 5min，取上清液 | ||
| 上清液 | 500 | 500 |
| 试剂三 | 1000 | 1000 |
充分混匀，室温静置2min后，400nm 处测定吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
