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可见分光光度法
产品简介：
β-GC（EC 3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。
β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：
提取液：液体50ml×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10ml双蒸水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体25ml×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体50ml×1瓶，4℃保存。
操作步骤：
一、样品的前处理：
1. 细菌或培养细胞：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2. 组织：
按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤：
1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2. 加样表
| 试剂名称（μl） | 对照管 | 测定管 |
| 试剂一 |
| 400 |
| 试剂二 | 500 | 500 |
| 样本 | 100 | 100 |
| 迅速混匀，放入37℃准确水浴30min后，立即放入沸水浴中煮沸5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变） | ||
| 试剂一 | 400 |
|
| 充分混匀，8000g，4℃，离心5min，取上清液
| ||
| 上清液 | 500 | 500 |
| 试剂三 | 1000 | 1000 |
| 充分混匀，室温静置2min后，用对照管调零，400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。 | ||
