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可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
产品内容：
提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入5mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体15mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体50mL×1 瓶，4℃保存。
产品说明：
β-GAL(EC 3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能够催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷键水解，此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量，还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解，释放自由的半乳糖。
β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL 活性。
自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1、 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤：
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2、 样本测定（在EP 管中依次加入下列试剂）：
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 试剂一 | 200 |
|
| 蒸馏水 |
| 200 |
| 试剂二 | 250 | 250 |
| 样本 | 50 | 50 |
| 迅速混匀，放入37℃准确水浴30min | ||
| 试剂三 | 1000 | 1000 |
充分混匀，400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。
