产品展示
优质供应
详细内容
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
多聚半乳糖醛酸酶（EC3.2.1.15）是一种细胞壁结合蛋白，可以催化果胶分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解，参与果胶的降解，使细胞壁结构解体，导致果实软化，与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御，细胞伸展发育以及木质化有关，在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域
具有较高的研究价值。
测定原理
多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与DNS试剂反应生成红棕色物质，在540nm有特征吸收峰，测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。
酶液提取
1．组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，
加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。16000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2．细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后 16000g，4℃离心10min，取上清置于冰上待测。
3．培养液：直接检测。
测定操作表
|
| 对照管 | 测定管 |
| 样本（μL） |
| 100 |
| 试剂一（μL） | 400 | 400 |
| 40℃水浴30min | ||
| 试剂二（μL） | 500 | 500 |
| 样本（μL） | 100 |
|
| 沸水浴5min，冰浴或自来水冷却，蒸馏水调零，1mL玻璃比色皿测定540nm处吸光值 A，△A=A 测定管-A 对照管。 | ||
