产品展示
优质供应
详细内容
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
产品内容:
提取液:液体60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加5mL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体37.5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:1μmol/mL 标准储备液10mL,4℃保存;
产品说明:
β-GD 广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液β-GD 活性对于研究胃癌具有重要的意义。
β-GD 催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞,通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、 样品测定的前处理
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
二、 测定步骤
1、 分光光度计预热30min 以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定(在EP 管中加入下列试剂)
试剂名称(μL) | 加样孔 | ||
测定管 | 标准管 | 空白管 | |
试剂一 | 100 | 100 | 100 |
试剂二 | 100 | 100 | 100 |
样本 | 50 |
|
|
1μmol/mL标准液 |
| 50 |
|
蒸馏水 |
|
| 50 |
混匀后,37℃水浴30min | |||
试剂三 | 750 | 750 | 750 |
混匀, 540nm 下测定各管吸光值 |
注意:标准管和空白管只需测一次。