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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
磷脂酶A2（EC3.1.1.4）是磷脂 sn-2位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。
测定原理
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱（HEPC）产生游离巯基，与DTNB反应生成黄色物质，在412nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、超速冷冻离心机、研钵、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体×5 瓶，-20℃避光保存。临用前根据用量每瓶加入4.5mL试剂二充分混匀。(3天使用完)
样品处理
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g 离心 5min，取全部上清于 4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于 1mL 试剂一。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后于4℃，10000g 离心5min，取全部上清于4℃、100000g 离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。
3. 血清：直接测定。
测定操作
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| 对照管 | 测定管 |
| 样品（μL） | 100 | 100 |
| 试剂二（μL） | 900 |
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| 试剂三（μL） |
| 900 |
| 充分混匀，37℃反应 10min，于1mL玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定412nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管- A对照管 | ||
