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详细内容
可见分光光度法
产品内容：
提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体5mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂二：液体25mL×1 瓶， 4℃保存。
产品说明：
丙酮酸通过乙酰CoA 连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。
丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈樱红色。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
操作步骤：
一、丙酮酸提取：
1、 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次），静置30min，8000g，常温离心10min，取上清待测。
2、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆，静置30min，8000g，常温离心10min，取上清待测。
3、 血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议取0.1mL 血清（浆）加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆，静置30min，8000g，常温离心10min，取上清待测。
二、测定步骤：
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。
2、 取300μL 样本+100μL 试剂一于1.5mL EP 管中，混匀，静置2min，加入500μL 试剂二，混匀，于520nm 波长处测定管吸光值A。
