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优质供应
详细内容
可见分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
产品内容 ：
提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：冰乙酸25 mL×1 瓶，4℃保存。（自备）
试剂二：液体25 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：甲苯50mL×1 瓶，4℃保存。（自备）
产品说明：
Pro 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内Pro 含量显著增加。Pro 增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标。
用磺基水杨酸（SA）提取Pro，加热处理后，Pro 与酸性茚三酮溶液反应生成红色；加甲苯萃取后，在520nm 测定吸光度。
需自备的仪器和用品 ：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、冰乙酸50mL、甲苯50mL、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、 样本的前处理：
1、 细菌、细胞或组织样品的制备：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10 4个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；之后置90℃振荡提取10min；10000g，25℃离心10min，取上清，冷却后待测
2、 血清（浆）样品：
按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议取0.1mL 血清（浆）加入1mL 提取液），充分混匀，之后置90℃振荡提取10 分钟，10000g，25℃离心10 分钟，取上清，冷却后待测。
二、 测定步骤：
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。
2、 样本测定：
(1) 取0.5mL 样本+0.5mL 试剂一+0.5mL 试剂二 于有盖试管中，置沸水浴中保温30min（盖紧，防止水分散失），每10min 振荡一次。
(2) 待冷却后，在试管中加入1mL 试剂三，振荡30s，静置片刻，使色素转至试剂三中；吸取0.8mL-1mL 上层溶液于1mL 玻璃比色皿中，于520nm 波长处比色，记录吸光值A。
