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可见分光光度法
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
产品内容：
试剂一×1 瓶，60 mL，4 ℃保存；
试剂二×1 瓶，20 mL，4 ℃保存；
试剂三×1 瓶，30 mL，常温保存；
试剂四×1 瓶，10 mL，常温保存；
试剂五×1 瓶，6 mL，常温保存；
试剂六×1瓶，6 mL，常温避光保存。
产品说明：
GLS（EC 3.5.1.2）存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
GLS 催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。
需自备仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤：
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至420nm，蒸馏水调零。
2、 样品测定（在EP 中加入下列试剂）：
| 试剂名称（uL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 25 |
|
| 蒸馏水 |
| 25 |
| 试剂一 | 100 | 100 |
| 试剂二 | 400 | 400 |
| 混匀，37℃水浴1 小时 | ||
| 试剂三 | 525 | 525 |
| 混匀，8000 g，25℃离心10 min；取上清液，在EP 管中加入下列试剂 | ||
| 上清液 | 650 | 650 |
| 试剂四 | 150 | 150 |
| 试剂五 | 100 | 100 |
| 试剂六 | 100 | 100 |
| 混匀，420nm 处读取吸光值A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。对照管只要做一管 | ||
