产品展示
优质供应
详细内容
植物铵态氮试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
氮素是构成生物体的一种必需元素,自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮,经过硝化微生物的作用转化成硝态氮,后者被植物或微生物同化成有机氮化物,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
测定原理
α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热,经氧化脱氨变成相应的 α-酮酸,酮酸进一步脱羧变成醛,水合茚三酮则被还原,在弱酸环境中,还原型茚三酮,氨和另一分子水合茚三酮反应,缩合生成蓝紫色物质,在 580nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 支,4℃避光保存。临用前加 0.5mL 蒸馏水充分溶解。
试剂三:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
样本处理
按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,室温匀浆后于 25℃,12000g 离心 10min,取上清待测。
测定操作表
| 空白管 | 测定管 |
样本(μL) |
| 200 |
蒸馏水(μL) | 200 |
|
试剂一(μL) | 300 | 300 |
试剂二(μL) | 10 | 10 |
充分混匀,沸水浴 5min 后自然冷却 10min | ||
试剂三(μL) | 500 | 500 |
充分混匀,于 1mL 玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定 580nm 处吸光值 A,分别记为 A 空白管和 A 测定管,△A=A 测定管-A 空白管 |
注意:空白管只需测定一次。