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6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）测试盒
点击次数：105发布时间：2019/12/12 15:44:40
更新日期：2024/8/8 17:56:42
所 在 地：中国大陆
产品型号：
优质供应
详细内容
紫外分光光度法
产品简介：
G6PDH广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是磷酸戊糖途径的关键酶，催化 6-磷酸葡萄糖氧化为 6 -磷酸葡萄糖酸内酯，同时将NADP+还原为NADPH，供生物合成及维持细胞内的还原状态用。因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。G6PDH催化NADP+还原生成NADPH，在340 nm下测定NADPH增加速率。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 ml石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：
提取液：液体60 ml×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体50 ml×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，-20℃保存；用时每支加550μl双蒸水充分溶解备用；剩余的4℃保存一周
试剂三：粉剂×1支，-20℃保存；用时每只加550μl双蒸水充分溶解备用；剩余的4℃保存一周
操作步骤：
一、样品测定的准备：
1、细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000:1 的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积（ml）为1:5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定操作：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、将试剂一置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴中预热10min左右。
3、加样表
| 试剂名称（μl） | 测定管 |
| 试剂一 | 750 |
| 试剂二 | 10 |
| 试剂三 | 10 |
| 样本 | 30 |
加样本的同时开始计时；混匀，在340 nm波长下记录1min时的初始吸光度A1和6min时的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
注意事项：
若ΔA大于0.5，需将酶液用提取液稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数。或将反应时间缩短至2min，使A2-A1小于0.5，可提高检测灵敏度。
