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试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：正是测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品内容：
试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1 支，-20℃保存。
混合试剂配制：临用前，在试剂二中加入试剂一40 mL，充分震荡溶解后加入全部试剂三，混匀。（注意：必须现配现用，当天使用完）
试剂四：液体×1 瓶，4℃保存。
产品说明：
GSH-Px 是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽（GSH）氧化的主要酶。GSH-Px不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与ROS反应，生成氧化型谷胱甘肽GSSG，从而保护生物膜免受ROS 的损害，维持细胞的正常功能；而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。
GSH-Px 催化H2O2氧化GSH，产生GSSG；谷胱甘肽还原酶（GR）催化NADPH 还原GSSG，再生GSH，同时NADPH 氧化生成NADP+；NADPH 在340 nm有特征吸收峰，而NADP+没有；通过测定340 nm光吸收减少速率来计算GSH-Px 活性。
自备仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL 石英比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1. 组织：按照组织质量（g）:试剂一体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取0.1g 组织，加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量104个：试剂一体积（ml）500~1000:1 的比例,建议500 万细胞加入1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（率300w，超声3 s，间隔7s，总时间3min）然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
二、测定操作:
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 混合试剂在25℃或者37℃（哺乳动物）水浴中预热30min 以上。
3. 空白管：依次在1mL石英比色皿中加入100μL 蒸馏水、800μL 预热的混合试剂，100μL试剂四，迅速混匀后于340nm处测定第10 s和第190s的吸光值，分别记为A空1和A空2，△A 空白管= A空1﹣A空2。
4. 测定管：依次在1mL 石英比色皿中加入100μL 上清液、800μL 预热的混合试剂，100μL试剂四，迅速混匀后于340nm 处测定第10 s和第190s 的吸光值，分别记为 A测1 和A测2，△A 测定管= A测1﹣A测2。
注意：空白管只需测定一次。
