产品展示
优质供应
详细内容
紫外分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样 本做预测定。
产品内容：
试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1 瓶，4℃保存。临用前加入5mL试剂二，混匀。
标准品：粉剂×1 瓶（棕色），4℃保存。临用前配制，加入 5.679 mL蒸馏水充分溶解；吸取0.1 mL上述溶液，加入0.9 mL蒸馏水，混匀，即100μmol/L AsA。
产品说明:
AsA 又称维生素c。AsA 是辅酶、自由基清除剂、电子共体/受体和草酸盐与酒石酸盐生物合成的底物等。作为植物细胞中*重要的抗氧化剂，AsA 在保护叶绿体免于氧化损伤起着举足轻重的作用，也是衡量农作物产品品质的重要指标。
抗坏血酸氧化酶（AAO）催化 AsA 氧化生成 DHA，通过测定 AsA 的氧化速率，即可计算出 AsA 含量。
自备仪器和用品：
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液器和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品中AsA 提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声3秒，间隔7秒，总时间 3min）；8000g，4℃离心 20min，取上清液置冰上混匀待测。
3. 血清等液体：直接测定。
二、AsA测定操作：
1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 265 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在 25℃水浴锅中预热 30 min。
3. 标准管：依次在比色皿中加入 100μL 标准液、800μL 试剂二和 100μL 试剂三，迅速混匀，在 265nm 测定，记录 30s 和 150s 的吸光值 A1 和 A2，△A 标准管= A1－A2。
4. 测定管：依次在比色皿中加入 100μL 上清液、800μL 试剂二和 100μL 试剂三，迅速混匀，在 265nm 测定，记录 30 s 和 150s 的吸光值 A3 和 A4，△A 测定管= A3－A4。
注意：标准管只需测定一次。
