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分光光度法
产品内容：
提取液：60%乙醇，自备。
试剂一：液体6mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体15mL×1 瓶，4℃保存。
产品说明：
植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在760nm 处有特征吸收峰，测760nm 处的吸光值，即可得样品总酚含量。
仪器设备（自备）：
烘箱、粉碎仪、40目筛、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿。
操作步骤：
1、 总酚提取：
将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.1g，加入2.5mL提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，破碎5秒，间歇8秒，60℃，提取30min。12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待测。
2、测定操作表：
|
| 对照管 | 测定管 |
| 样本待测液（mL） | 0.05 | 0.05 |
| 试剂一（mL） |
| 0.25 |
| 混匀，室温静置2min | ||
| 试剂二（mL） | 0.25 | 0.25 |
| 双蒸水（mL） | 0.7 | 0.45 |
| 混匀，室温静置10 min，双蒸水调零，波长760nm，1mL比色皿， 测定各管吸光度值（ΔA760=A测定-A对照）。 | ||
计算公式：
标准曲线：y=5.615x+0.0012，R2=0.9994
总酚含量（mg/g组织）=(ΔA760-0.0012) ÷5.615×V反总÷（V样÷V样总×W）=8.905×(ΔA760-0.0012) ÷W
V 样总：加入提取液体体积，2.5mL；V反总：反应总体积，1mL；V 样：反应中样品体，0.05mL；W：样品质量，g。
注意事项：
1. OD 值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂一对皮肤有一定的刺激性，请操作时做好防护措施。
