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紫外分光光度法
产品内容:
试剂一:液体80mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体10mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体5mL×1 瓶,4℃保存。
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品说明:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系, 在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿。
操作步骤:
一、酶液提取
1. 组织:按照质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g,加入1mL 试剂一)加入试剂一,冰浴匀浆后于4℃,10000g 离心10min,取上清置于冰上待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万细胞加入1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3 秒,间隔7 秒,总时间3min);然后4℃,10000g 离心10min,取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体:直接检测。
二、测定操作
| 测定管 |
试剂一(mL) | 0.6 |
试剂二(mL) | 0.2 |
样品(mL) | 0.1 |
试剂三(mL) | 0.1 |
充分混匀,于1mL 石英比色皿,蒸馏水调零,测定310nm 处10s 和310s吸光值,记为A1 和A2,△A=A2- A1 |