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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
维生素 B6（Vitamin B6）又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，在细胞中参与多种蛋白质和氨基酸的代谢，对生物体具有极其重要的作用。
测定原理
VB6与4-氨基安替比林在强氧化剂作用下生成稳定的黄色化合物，在390nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、恒温水浴锅、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液：液体 35mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 1mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。
样本处理
1. 组织：将样品磨碎，按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入0.6mL提取液）加入提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，16000rpm 离心10min，取上清测定（ 动物组织等蛋白含量较高的样本建议离心20-30分钟）。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入0.6mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔 7秒，总时间3min）；加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，16000rpm 离心10min，取上清测定。
3. 血清：直接测定。
测定操作
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| 空白管 | 测定管 |
| 样品（μL） |
| 200 |
| 试剂一（μL） | 200 |
|
| 试剂二（μL） | 200 | 200 |
| 试剂三（μL） | 300 | 300 |
| 试剂四（μL） | 300 | 300 |
| 充分混匀，25℃反应 20min，于 1mL 玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定 390nm 处吸 光值，记为 A 空白管和 A 测定管，△A=A 测定管-A 空白管。 | ||
