产品展示
优质供应
详细内容
(Fructose 1,6-bisphosphatase，FBP)试剂盒说明书
分光光度法
产品内容：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入40mL试剂四充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂二：液体×1瓶，4℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体50mL×1 瓶， 4℃保存；
产品说明：
果糖-1,6 二磷酸酶又称果糖1,6 二磷酸酯酶，催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和无机磷，在糖的异生代谢和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。
FBP 催化1,6 二磷酸果糖和水生成6 磷酸果糖和无机磷，在反应体系中添加的磷酸葡萄糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm下测定NADPH增加速率，即可计算FBP 活性。
需自备的仪器和用品：
分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本的前处理
1、 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10 分钟。
3、 加样表：
| 试剂名称（μL） | 测定管 |
| 样本 | 100 |
| 试剂二 | 50 |
| 试剂三 | 50 |
| 试剂一 | 800 |
将上述试剂按顺序加入1 mL石英比色皿中，立即混匀，加入*后一个试剂的同时开始时，在340 nm波长下记录反应1min后吸光度A1和反应6min 后的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
