冰冻干燥就是使蛋白样品液在预先冰冻的状态下，用抽真空的方法，不经液态，直接升华，除去其中所含水分，并使样品蛋白成为干燥制剂的过程。在免疫酶技术中，所用的血清、酶等在溶液中容易变性腐败，制成干燥制剂后可长时间地在室温或冰箱（4℃）内保存而不失活，并且便于携带。

冰冻真空干燥与真空干燥和喷雾干燥相比，在实验中应用得更多更普遍。

1.冰冻干燥血清的程序

（1）先将适量血清倾倒在适当大小的培养皿中（样品液厚度在1cm以下），在低温—20℃以下）下冰冻成固态。

（2）将冰冻血清块连同培养皿放进真空干燥器内，立即封闭干燥器（事先在盖沿涂上凡士林），开动油泵，一般经5-10h后，即可得冰冻干燥制剂。

（3）在冰冻干燥装置中，分别放置固体氢氧化钠和五氧化二磷，真空干燥器上端抽气管通过五氧化二磷干燥管与真空泵相连。

（4）冰冻干燥完毕。首先逐渐打开干燥器顶盖玻璃阀，慢慢放气，待整个系统中压力上升到大气压后，取下样品干燥容器，*后关闭真空油泵。

2.注意

（1）样品如果是溶液，则是水溶液，以避免有机溶剂降低冰点，进入泵内。浓度要适中，不低于1.5%。

（2）样品如用缓冲液作为溶剂，用有挥发性的，例如碳酸盐或醋酸盐缓冲液;若是非挥发性的，则要考虑pH和盐浓度对样品的影响。例如用pH7.0磷酸盐缓冲液，由于冰冻干燥时Na2盐比Na盐先结晶，pH降至约3.5，对样品有害。在样品液中加入少量的明胶、乳糖或葡萄糖等，有利于保存活性。

（3）冰冻干燥的效果，取决于真空泵的真空度与口径合适的管道。真空油泵选用抽空容量大的，所有接管应力求粗短。

（4）抽真空约30min，如盛有预冻样品的容器结霜，表明运转良好。由于样品中水分的升华，温度降低，样品自然处于冰冻状态，不必在干燥器外边采取冷却措施。

（5）样品预冻时先放在普通冰箱冷至0℃后，迅速移入一20℃以下的冰箱骤冷冻结。