SW620（人结肠癌细胞）知识解析！

 

一、细胞简介

平台编号：bio-73166

拉丁属名：SW620

细胞名称：SW620（人结肠癌细胞）

种属：人

年龄（性别）：男；51岁

组织来源：结直肠腺癌，来自转移淋巴结

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

背景描述：SW620细胞是从一个51岁男性白人组织中分离得到的，由A·Leibovitz等从一个淋巴结建株。SW620细胞主要由无绒毛的小园球细胞和双极细胞组成;SW620细胞仅合成少量癌胚抗原(CEA)，在裸鼠中有高度的致瘤性。

生长培养基：DMEM高糖(货号:PM150210)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

运输方式：快递干冰运输（1 vial）或活细胞运输（T-25 flasks）。

注意事项：(1)严格无菌操作；

(2)本产品只供科研使用，不可应用于临床。

 

二、SW620(人结肠癌细胞)生长：初代培养或传代的细胞悬液接种以后，经过长短不同的潜伏期后开始增殖。传代细胞系、胚胎组织或幼体组织一般在第二天即可见细胞生长，一周内便可连接成片。接种细胞长满瓶壁后，应及时做再培养。否则由于营养物消耗和代谢积累，细胞即进入停止期或退化期。此时细胞轮廓增强，细胞内常出现颗粒状堆积物，为膨胀的线粒体，SW620(人结肠癌细胞)质呈空泡化，细胞变圆、粗糙，严重时细胞从瓶壁脱落，只有及时再做传代处理，才能使细胞继续生长繁殖。

 

三、SW620(人结肠癌细胞)功能：

（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。

（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。

（3）与血管疾病的进展和稳定有关。

 生理变化：

（1）主动脉硬化。

（2）主动脉瘤

（3）主动脉钙化。

基本特性：

（1）组织来源于正常大鼠大动脉组织。

（2）鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。

（3）原代细胞培养末期液氮冻存。

（4）每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（5）肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

 

四、SW620（人结肠癌细胞）具体操作

1、处死孕鼠，全身置于75%酒精里浸泡，然后在超净台中用剪刀和镊子将孕鼠皮肤剪开，用另外一组剪刀、镊子剪开腹部肌层，露出子宫，*后用第三组剪刀和镊子将子宫小心取出放在盛有D-PBS的玻璃平皿中，冲洗去血。

2、用两把弯镊子将胚胎外的胞膜小心去除，然后夹掉头和内脏，将其余胚胎转移到一个装有30 ml D-PBS的50 ml离心管中，轻轻颠倒两次，倒掉D-PBS，再重复此步骤一次，注意要留少许D-PBS，然后将胚胎转移到另一装有D-PBS的平皿中，并用手术刀片将其细细切碎。

3、用200 ul的移液枪反复、快速地吹打平皿中的液体，转移至15 ml离心管中，于4℃ 1500 rpm离心5分钟，倒掉上清，以10 ml胰酶重悬沉淀，放在37℃水浴中消化30分钟，且每隔五分钟轻轻晃动，使之充分消化。

4、将上层细胞悬液倒入一个装有10 ml MEF生长培养基的50 ml离心管中，用200目的尼龙网过滤后，以1 500 rpm离心5分钟收集细胞，再用30 ml MEF生长培养基洗涤两次。

5、细胞沉淀用15 ml MEF生长培养基重悬后进行细胞计数(一般8只14天的胎鼠可获得2-3x107细胞)。

6、3x106细胞悬浮于15 ml MEF生长培养基中，接种到200 ml培养瓶中。

7、24小时后更换新鲜的MEF生长培养基。

8、细胞长满后，先用D-PBS冲洗，倒掉后加胰酶消化(此步时间不宜过长，作者一般不超过五分钟)，按1:5传代。

9、细胞再次长到覆盖率80-90%左右，将其消化后，常规冻存(冻存液要现配)。

 

五、注意事项

1、原代培养，一定要避免污染。

2、MEF生存能力有限，如果不冻存，体外存活十代左右。

3、冻存后复苏的细胞只能传代一次，因为这些细胞繁殖能力有限。

4、消化细胞时间不要过长。

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