BEL-7402/5-Fu人肝癌多药耐药细胞  （含STR鉴定）

细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个*的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养，既包括微生物细胞的培养，细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术*的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中z核心、z基础的技术。

BEL-7402/5-Fu人肝癌多药耐药细胞

                  在培养细胞的过程中，或许你会有一系列的问题想要问。上海文韧为大家整理了一些关于细胞的常见问题解答，不知道里面有没有您想要问的呢!

1.细胞成长曲线测守时为什么要做重复孔？
答：测定细胞成长曲线细胞计数时挑选 3 个复孔，每孔分别计三次，取其平均值，目的是减小操作差错。
2.为什么制作的细胞成长曲线没有到达平台期？
答：可能有以下原因：一是细胞接种密度过低；二是细胞培育时刻过短；三是细胞成长状况欠好，使其不能正常增殖。
3. 怎么挑选细胞接种数？
答：可根据细胞传代培育过程中接种数及细胞成长周期进行核算，细胞接种数因细胞的不同而不同。
4.细胞计数时为什么要用台盼蓝染色？
答：参加台盼蓝后，活细胞不上色，台盼蓝上色的细胞呈深蓝色，是不健康或已死亡的细胞，不能计数。
5.问：测定细胞成长曲线的含义是什么？
答：细胞成长曲线是测定细胞肯定成长数的常用办法，也是断定细胞生机的重要目标，是培育细胞生物学特性的基本参数。由于细胞太小，无法测单个细胞的成长状况，所以测细胞集体的成长曲线。
6.细胞成长曲线测定周期是几天？
答：一般是一个星期。
7.细胞成长曲线还有其他办法制作吗？
答：当然有。我们说到z多的是直接计数的办法，除此以外还有相对计数的办法，该类办法首先要制作规范曲线，标定细胞数和某个变量的函数，然后我们只需要测定每天这个变量的值便能够核算出细胞数。常用的是 MTT、CCK8 等比色的办法。
8.为什么细胞计数*天，细胞数没有添加反而削减？
答：一般细胞传代后，会有一个成长缓慢的潜伏期，细胞不增殖，而细胞会有正常的逝shi，故细胞数不添加反而削减。

  体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意，技术操作不规范,也会导致污染。因而．为在一切操作中为大可能的无菌．每一项工作都必须做到有条不紊和靠。

    【培养前准备】在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后．囚物品不全往返拿取而增加污染机会。

    【操作消毒】无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要)．紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置．否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。
    【洗手和着装】原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时，因整个前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，并于开始操作前要用75％酒精消毒手。如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需洗手还要戴K罩、着消毒衣帽。
    【火焰消毒】 在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或灯。以后一切操作，如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等，都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意：金属器械不能在为焰中烧的时间过长，以防退火，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜，再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时，火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞。

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