GBC-SD人胆囊癌细胞（STR鉴定）

名称：GBC-SD 人胆囊癌细胞

种数：人

组织来源：胆囊

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁细胞

原代细胞、细胞系与细胞株简单介绍：原代细胞(primary cell)是指从机体的组织中经蛋白酶或其它的方法获得、并在体外进行培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。

细胞系(cell strain)：原代培养物经传代成功后即为细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系， 培养50代以上并无限培养下去。

细胞株(cell line)：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株，也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。如果不能继续传代或传代数有限，称为有限细胞株；如果可以连续传代，称为连续细胞株。对于人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定的并连续传代的即可称为连续性株或系。

现行的人教社大纲版选修教材中是这样介绍细胞株和细胞系的：原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去，这些存活的细胞一般能够传到40--50代，这种传代细胞叫做细胞株。细胞株的遗传物质没有发生改变。当细胞传至50代以后又会出现“危机”，不能再传下去。但是有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称为细胞系。

原代细胞的优势是细胞的性状和生物学特性接近于期生理状态，但其缺点是原代细胞分离困难，生长时间有限。

细胞系或细胞株的优势是细胞传得代数较多或无限传代，较容易培养，但缺点是随着培养代数的增加，某些细胞的生理性状可能丢失。

基于如上比较，很多科研工作者会选择原代细胞从事科研实验。

GBC-SD人胆囊癌细胞的冻存和复苏

1. 实验前准备：细胞室及工作台紫外线照射15min；培养液、PBS、胰酶、小牛血清、DMSO、恒温水浴箱37℃预热备用；收集对数生细胞，在冻存前一天换液

2．用吸管吸出培养瓶中的细胞培养液，PBS清洗2遍吸出冲洗液，加入适量胰蛋白酶消化。

3. 适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。吸管吸取培养液吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。

4. 用吸管将培养液加入冻存管中，离心(1000r/min，10分钟)。

5. 去上清液，加入与细胞悬液等量的冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀

6. 冷存管置于4℃10分钟----20℃30分钟----80℃16～18小时(或隔夜)---液氮槽vaporphase储存。-20℃不可超过1h，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

7．记录每一个冷冻管的位置以确保在以后应用时能够找到每一个冷冻管。

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细胞复苏

1.室内紫外消毒；培养基、PBS于37℃恒温水浴预热备用。

2.自液氮罐中取出冷冻管，立即放入37℃水槽中快速解冻，离心。

3.去上清，加入培养基，吹打，然后移入培养瓶中，用培养基清洗冻存管，清洗液也移入培养瓶中。

4.于培养瓶中加入适量培养基，放入CO2培养箱中培养

5.记录复苏日期；次日换液。

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