正品Sigma特级胎牛血清的质量要求

（一）WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求：

1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家，并应具备适当的监测系统。

2.有些国家还要求牛血清来自没有用过反刍动物蛋白饲料喂养的牛群。

3.要能证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。

4.血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。

5.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无大肠杆菌噬菌体污染。

6.要求血清对细胞有良好的支持繁殖作用。

（二）我国在对牛血清的质量标准z早在2000年版《中国生物制品主要原辅材料质控标准》中提出。包括物理性状、总蛋白，血红蛋白、细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素，支持细胞增殖检查。2005版药典颁布之后，小牛血清质量标准被纳入《中国药典》2005年版 第三部 生物制品分册。

（三）美国对牛血清的质量要求：

Gibco 和Hyclone等美国主要血清供应商的牛血清都已进入到我国市场，他们对血清质量标准有严格要求，从血清来源到产品质量都有明确规定。

1、血清来源 ：可从世界各地收集胎牛血清，但必须符合其质量标准和美国农业部进口要求。

2、血清的收集：必须符合工业生产的标准，低温采集，一次分离，分离后立即混合冻存。

3、血清的制备：超低IgG胎牛血清、透析血清、γ-射线辐照；

4、除菌过滤：0.22μm和0.1μm滤膜过滤；

5、成品分装：根据需要分装成不同规格。

正品Sigma特级胎牛血清保存方法

1、需要长期保存的（特级胎牛血清SigmaF2442）血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在 37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏，而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶,可 将40～45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前，必须预留一 定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

2、一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接 过滤血清。

3、瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全 部溶解后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度 与成分均一,减少沈淀的发生。.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而 出现沉淀。

4、热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体 成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体 参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞 发生化学趋化和活化。

5、血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身 的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物 的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑 点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。

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