慧嘉生物小鼠Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)ELISA检测试剂盒课题用实验细节，ELISA实验时可以留意些环节，将人为因素降低到zui小：

1.各试剂使用请务必离心，使试剂均尽可能的集中在管底。

2.配制试剂的时候，确保高浓度试剂的加入，体积的计算合理；（冻干标准品溶

解要充分，可用枪头对准管底部反复吸打混匀，0.2703922848然后就是各个浓度点的倍比稀释，

倍比稀释时，要充分混匀后再进行下步的稀释）

3.洗液配制时，水质要合格（pH 7.0~7.4）；

4.承装工作液的器皿要洁净，不可是装过酸性、碱性或其他灭活性物质的；

5.温箱的温度要恒定，实验中时刻关注，以防止出现阶段性升温过高的现象等。

6.洗板环节，要保证充分洗涤。手动洗板要尽量拍干液体，但切记不可用力过猛。

洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，同时经常清洗，避免污染。

7.显色时间以说明书为准，般控制在20min为佳，注意避光。

 
慧嘉生物小鼠Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)ELISA检测试剂盒课题用样本处理：

血清：全血标本请于室温放置2小时或4°C过夜后于2 - 8°C 1000 x g离心15分钟，取上清即可立即检测；或进行分装，并将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心，然后检测。

 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 x g离心15分钟，取上清即可立即检测；或进行分装，并将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。0.2993931944解冻后的样品应再次离心，然后检测。

细胞培养物上清：标本于2 - 8°C 1000 x g离心15分钟取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20°C或-80°C保存。避免反复冻融。

组织裂解液：取100mg组织，用1X PBS洗去血污。剪成小块放入组织研磨器（匀浆管）中，加入1 ml 1X PBS，制成匀浆，然后置于-20°C过夜。经过反复冻融2次处理破坏细胞膜后，将组织匀浆于2 - 8°C 5000 x g离心5分钟取上清。取适量上清液立即进行实验，或将上清分装保存于-20°C或-80°C。解冻后的样品应再次离心，然后检测。避免反复冻融。

 尿液：用无菌管收集尿液于2 - 8°C 1000 x g离心15分钟取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20°C或-80°C保存。避免反复冻融。试验再次离心，0.3301220883以去除在样本保存期间可能出现的些沉淀。

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