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技术文章

小鼠细胞色素C氧化酶(COX)ELISA试剂盒@行业动态

点击次数:11674 发布时间:2022/5/14 13:16:28

 

小鼠细胞色素C氧化酶(COXELISA试剂盒@行业动态

产品参数

指标名称:小鼠细胞色素C氧化酶(COXELISA试剂盒

规格:48T, 96T

品牌:研启生物

检测波长:450nm

所需样本体积:保险量50ul,实际上样10ul

适用范围:仅供科研课题研究,不得用于临床诊断。

检测样本种类:血清,血浆,尿液,组织匀浆,细胞上清液,脑脊液,灌洗液,粪便等样本.

研启供应属种有:人、大鼠、小鼠、猴子、猪牛羊、犬、鸡鸭鹅、植物、鱼、昆虫ELISA试剂盒等

试剂盒保存:2-8℃冷藏保存,保质期6个月。

样本处理及要求

1.血清:将收集于血清分离管的全血标本 在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。

2.血浆:EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mLPBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

小鼠细胞色素C氧化酶(COXELISA试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8

12孔×4

标准品

0.3mL*6

0.3mL*6

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

 

备注:

1、标准品浓度依次为:详见说明书(可联系客服咨询相关资料)

2、经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内。当有部分样本值超过大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

 

注意事项

1、严格按照规定的时间和温度进行温育以得到准确结果。所有试剂都必须在使用达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6、在储存和温育时避免强光直接照射。

7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9、不能使用过期产品。

10、如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按120稀释,即120×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

小鼠细胞色素C氧化酶(COXELISA试剂盒操作步骤

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min

7.每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

试剂盒性能

特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

重复性:板内变异系数小于10%,板间变异系数小于15%

 

公司介绍

上海研启生物科技有限公司(Shanghai Zhen Ke Biological Technology Co., Ltd. )是一家业从事产品研发生产、市场销售、技术服务为一体的高科技生物技术公司。公司与各大高校、医院及权威科研单位保持着良好的合作关系,公司的产品质量及服务态度得到了他们的满意。研启生物本着客户至上的原则为客户提供好的产品,产品有任何质量的问题免费包退换(非人为因素造成的)。公司还提供免费代测服务并确保数据的准确性。产品优惠促销活动中,欢迎广大新老客户来咨询选购。

 

 

原创作者:上海研启生物科技有限公司

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