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大鼠抗小肠杯状细胞抗体(IGA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

点击次数: 415发布时间:2011/3/7

  • 上 传 者: 上海研启生物科技有限公司
  • 上传时间: 2020/5/13 19:44:02
  • 文件大小: 46KB
  • 文件类型: jpg
  • 所属分类: 应用方法
  • 下载次数: 4次
  • 查看次数: 415

资料简介:

大鼠抗小肠杯状细胞抗体(IGA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。

检测范围: 96T

3.2 pg/ml -150pg/ml

使用目的:

本试剂盒用于测定大鼠血清血浆及相关液体样本中抗小肠杯状细胞抗IGA含量。 实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中大鼠抗小肠杯状细胞抗IGA水平用纯化

的抗原包被微孔板制成固相抗原往包被的微孔中依次加入抗小肠杯状细胞抗IGA HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底TMB 显色TMBHRP 酶的催化下转化成蓝色并在酸的作用下转化成*终的黄色颜色的深浅和样品中的抗小肠杯状细胞抗体(IGA)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD,通过标准曲线计算样品中大鼠抗小肠杯状细胞抗体(IGA)浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(240pg/ml

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

5

显色A

6ml×1

11

封板膜

6

显色B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测NaN3的样品,NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释本试剂盒提供原倍标准品一支用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

120pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加150μl标准品稀释液

60pg/ml

4号标准品

150μl5号标准品加150μl标准品稀释液

30pg/ml

3号标准品

150μl4号标准品加150μl标准品稀释液

15pg/ml

2号标准品

150μl3号标准品加150μl标准品稀释液

7.5pg/ml

1号标准品

150μl2号标准品加150μl标准品稀释液

2. 加样分别设空白(空白对照孔不加样品及酶标试剂其余各步操作相同标准孔、

待测样品孔在酶标包被板上标准品准确加50μl待测样品孔中先加样品稀释40μl


然后再加待测样10μl(样品*终稀释度5。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后37℃温30分钟。

4. 配液:30倍浓缩洗涤液用蒸馏30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静30秒后弃去,如此

5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作3

8. 洗涤:操作5

9. 显色:每孔先加入显色A50μl,再加入显色B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

10分钟.

10. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色

11. 测定以空白空调零450nm波长依序测量各孔的吸光OD 测定应在加终止

15分钟以内进行。

操作程序总结:

准物浓度横坐OD 纵坐,在标纸绘出线,据样品的

OD值由标准曲线查出相应的浓度再乘以稀释倍数或用标准物的浓度OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式将样品OD 值代入方程式计算出样品浓度再乘以稀释

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