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资料下载

猪白细胞介素9(IL-9)酶联免疫分析试剂盒使用

点击次数: 357发布时间:2011/3/7

  • 上 传 者: 上海研启生物科技有限公司
  • 上传时间: 2020/5/28 20:40:36
  • 文件大小: 50KB
  • 文件类型: jpg
  • 所属分类: 应用方法
  • 下载次数: 2次
  • 查看次数: 357

资料简介: 猪白细胞介素9IL-9)酶联免疫分析试剂盒使


本试剂盒仅供研究使用。

检测范围: 96T

3 ng/L -100 ng/L

使用目的:

清,液体本中9IL-9)含量。 实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪白细胞介素 9IL-9)水平。用纯化的猪白细

胞介9IL-9)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加白细胞介9IL-9HRP 标记的白细胞介9IL-9)抗体结合形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中白细胞介素 9IL-9)呈正相关。用酶标450nm 波长下测定吸光度OD,通过标准曲线计算样品中猪白细胞介素 9IL-9)浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(192ng/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

5

显色A

6ml×1

11

封板膜

6

显色B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

马上进试验标本放于-20存,但应避免反复冻融

2.不检测含 NaN3样品,NaN3 制辣根氧化物酶的HRP)活性。

操作步骤

1. 稀释剂盒供原倍标准用户可按照下图表在小试管中进行稀

释。

96ng/L

号标准品

150µl的原倍标准品加入 150µl标准品稀释液

48ng/L

4号标准品

150µl5号标准品加150µl标准品稀释液

24 ng/L

3号标准品

150µl4号标准品加150µl标准品稀释液

12 ng/L

2号标准品

150µl3号标准品加150µl标准品稀释液

ng/L

1号标准品

150µl2号标准品加150µl标准品稀释液

2. 加样分别设空白空白对照孔不加样品及酶标试其余各步操作相同标准孔、


板上准品准50µl样品孔先加样品稀40µl后再待测样10µl(样品*终稀释 5。加样将品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30分钟。

4. 30浓缩洗涤液蒸馏水 30 稀释后

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此

5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7. 温育:操作3

8. 洗涤:操作5

9. 显色:每孔先加入显色A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

10分钟.

10. 终止:每孔加终50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色

11. 白空调零450nm依序测各孔吸光OD  应在加终止

15分钟以内进行。

操作程序总结:

 

准物浓度横坐OD 纵坐,在标纸绘出线,据样

OD线应的乘以稀倍数标准物的浓 OD算出标


线线OD程式乘以倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未

用完,板条应装入密封袋中保存。

2洗涤液可能会有结晶析出,稀释时在水浴加温助,洗时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间

控制5分钟内,如标数量多推荐使用排枪加样。

4请每次测定的同时做标准曲线做复孔如标本中待测物质含量过高(样OD

 OD数(n后再测定算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5

5性使用以避免叉污染。

6.底物请避光保存。

7按照说书的操作进行,试验果判定须以酶标仪数为.

8涤液和种废弃物都按传染处理。

9.本剂不同号组分不得混用。

保存条件及有效期

1.试剂盒保存2-8℃。

2.有效期:6个月

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