服务简介

几乎所有的蛋白质合成都起始于N-端，蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着巨大的影响力。例如N-端序列影响蛋白质的半衰期，同时关联着蛋白亚细胞器定位等，这些与蛋白的功能和稳定性息息相关，对蛋白进行N-端测序分析，有利于帮助分析蛋白质的高结构，揭示蛋白质的生物学功能。

对蛋白N端测序主要分类两大类，其一为非质谱技术，其二为质谱技术。各自都有其使用的长处和制约之处。蛋白质和多肽N-端测序技术是以Edman化学降解法为基础的。Edman化学降解是测定蛋白质一结构的方法主要是从蛋白质或多肽氨基酸末端进行分析，其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的N-端残基的偶联，苯氨基硫甲酰酞（PTC-肽）环化裂解，和噻唑呤酮苯氨（ATZ）转化为苯异硫尿氨基酸（PTH-氨基酸）三个主要的化学步骤，每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基，同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解，而后通过转移的PTH-氨基酸鉴定实现蛋白质序列的测定。

百欧泰拥有多年的蛋白组学研究经验，同时拥有经验丰富的技术人员，优质的测序仪器，应用现有的质谱技术平台，可以提供高质量的蛋白质N端测序服务。采用完善Edman测序系统，为广大科研工作者和科研客户提供纯化后蛋白产物、蛋白品、抗体以及蛋白疫苗的N端测序服务。我们的不断自我完善测序系统体系，通过Edman降解法可以确保精准测定N端多个氨基酸的序列信息。

蛋白质N端测序服务－－Edman法

Edman法测定单个氨基酸循环包括3步：步是在碱性条件下，PITC与蛋白N端的游离氨基结合；第二步是在酸性溶液中，N端残基被切除；第三步是PITC结合的残基转化成为更为稳定的PTH残基，经过在线的HPLC分析，根据洗脱时间来确定氨基酸种类。

测序步骤：蛋白样品一般行SDS-PAGE的分离，保证样品的纯度满足测序的要求；随后将SDS-PAGE上的蛋白样品转移到PVDF膜上；经过染色确定把蛋白条带并切出；Edman测序仪对得到的PVDF膜上的蛋白样品进行分析。

样品要求

服务优势

蛋白表达及pulldown产物的鉴定：重组蛋白氨基酸顺序验证以及各种免疫沉淀蛋白产物的验证

细胞株表达产物的验证：验证细胞株建立和发酵过程中蛋白产物N端甲硫氨酸和信号肽是否正确处理

超长氨基酸检测：蛋白质N端长达67个氨基酸测序

抗体药物N端序列验证

天然提取，分离纯化的小分子多肽序列鉴定

实验周期快：2-3周

蛋白质测序服务信息登记表.docx

Edman测序样品送样须知.pdf