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卡梅德生物为客户提供的服务包括磷酸化位点的分析,磷酸化与非磷酸化多肽抗原设计与合成,噬菌体抗体文库构建以及抗体纯化与配对服务。
服务流程与内容:
步骤 | 服务内容 | 交付 |
抗原设计与合成 | 1. 客户提供抗原(多肽,蛋白),纯度>90% 2. 卡梅德设计与合成磷酸化与非磷酸化抗原(可选) | (抗原由卡梅德制备) *磷酸化与非磷酸化抗原的MS和HPLC 报告 *2-5 mg 磷酸化多肽, 纯度>90% *2-5 mg非磷酸化多肽, 纯度>90% |
动物免疫 | 方案一:免疫5 只Balb/c 小鼠(采用小鼠免疫佐剂,20天即可快速产生高抗体滴度血清),ELISA检测血清效价 方案二:免疫2-3 新西兰大白兔(采用兔用免疫佐剂,28天可产生高抗体滴度),ELISA检测血清效价(其他动物可选) | *1-2ml免疫血清 *ELISA血清效价验证报告 |
抗体噬菌体展示文库制备 | 1. 收集免疫后的淋巴B细胞 2. 提取mRNA,PCR克隆cDNA,噬菌体载体构建,转化,扩增 3. 磷酸化与非磷酸化抗原进行抗体文库正筛和反筛 4. 阳性克隆再进行扩增,穿梭质粒构建 5. 小规模与大规模哺乳体系表达(293,CHO),抗体纯化与验证 | *重组表达质粒 *2-5 mg 纯化重组抗体 *ELISA报告,含效价,交叉实验报告 *抗体识别磷酸化抗原效价不低于105且不与非磷酸化抗原反应(ELISA) *Western Blot验证报告(可选) |
服务优势:
-- 高特异性:所制备重组单抗只识别特定磷酸化位点,与非磷酸化抗原无反应
-- 全程可追溯的文件支撑体系,GMP/GLP别
-- 高抗体效价:保证型抗体ELISA效价可达~105
-- 多种制备规模:5,15,80L 发酵罐别可选