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手把手教会您如何正确校正紫外可见分光光度计！
点击次数：15 发布时间：2024/11/16 17:11:12
对于紫外可见分光光度计而言在使用前必须要做基线校正，对于此项工作的原理和操作方法许多使用者的认识不尽相同；为此谈谈我们的认识。
1、为何要做基线校正？
大家都知道，紫外可见分光光度计的光学系统基本是由光源、单色器、检测器等三部分组成的。在我们使用的波长区域中，上述部件在不同的波长下的响应值均不相同；通俗地说、即使没有样品，仪器如果不做基线校正，那么在190nm至1100nm的范围中，吸光值或透过率不会是一条直线，这是一种客观的物理现象。
2、被校正的基线种类和用途：
①系统基线：
所谓系统基线就是仪器固有的波长范围的总基线；例如一台紫外可见分光光度计出厂设计的波长全程范围是190nm至1100nm，那么它的系统基线就是这个范围。一般来讲，作为分析人员对一台仪器做全程扫描测试是比较少见的；之所以要做系统基线的目的一般是将仪器的光学系统的响应值校正到基本一致；这就类似马拉松赛跑一样，只要大家在同一起跑处比赛，前后差几米出发无所谓。
②用户基线：
所谓用户基线就是分析者自己设定的测量波长区域的一段基线；由于这是分析所需要的区域，为了保证测试的准确性，故用户基线的校正是非常重要和必要的；这就类似百米赛跑一样，运动员要在同一个起跑线上比赛而不能抢跑，否则无法准确计算成绩。
3、基线校正的方法
①系统基线：
系统基线的校正较为简单，一般情况下样品室内不放样品，仅做光学系统的校正；如果一定要使用全波段的测量那另当别论。同时需要注意的是：系统基线无需经 常校正，一般半个月或一个月校正校正一次即可。对有的仪器来说，系统基线校正过于频繁反而会造成基线漂移严重。
②用户基线校正方法：
两只比色杯盛有空白溶液分别放置在样品及参比光路中，校正波长范围要大于分析波长范围；例如、分析设定范围为220nm-500nm，那么校正波长就要设定为210nm-510nm；等待校正结束后再将波长设定回到原来的220nm-500nm范围。
4、基线校正的注意事项：
①基线校正时要保证紫外可见分光光度计有一定的预热时间；
②每更换一种参比溶液后均要重新做基线校正；
③如果参比溶液的吸光度大于样品的吸光度值时测试结果会出现负值，此时要考虑使用何种溶液做基线校正了。
原创作者：上海分析仪器销售中心第一营业部
