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在免疫组化染色后的镜下观察中,有发现这样的结果,阳性物反应不强,时隐时现,表达不均匀,有时可出现假阴性,这是因为:
1.组织在用甲醛固定的过程中所形成的醛键可封闭抗原的决定簇。甲醛与组织蛋白质类的反应是多样而复杂的,因为它能和多种不同的功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键8。这也是甲醛的一个作用,因为它是一种聚合固定剂,因而能在相邻的蛋白质键间形成桥键的作用。
2. 甲醛在保存进程中会形成羟甲基,也可封闭抗原决定簇。据French和Edsall的研究认为,遇到的甲醇反应,就是加到一个含反应性氢原子的化合物中,形成一个羟甲基化合物。
3.在组织固定过程中,甲醛与蛋白质发生交联,形成醛交联蛋白,这种化合物封闭了抗原,使之无法表达出来。
为了解决上述存在的问题,更好地暴露出抗原,将其很好地显示出来,世界上公认的方法就是必须进行抗原修复。
至今为止,抗原修复有许多种方法,在这些方法中,有的是根据抗体的要求来进行,有的是根据抗原的表达程度来进行,我们则对每种病例每项检测,都要求必须进行抗原修复,以达到抗原全面表达的状态。