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alp碱性磷酸酶染色服务技术介绍
碱性磷酸酶染色,又称Alp染色，是用于检测骨细胞、骨组织、肾、肝碱性磷酸酶的染色方法，使碱性磷酸酶呈黑色，细胞核呈浅蓝色，这是成熟成骨细胞的标志性酶;也可用于肝炎和肾炎的检测。
碱性磷酸酶染色实验流程
(1)样本接收：石蜡切片、细胞爬片、冰冻切片
(2)实验步骤：脱蜡至水—染液配制-Alp染色-苏木素浅染核
(3)实验结果：染色好的玻片
alp碱性磷酸酶染色服务注意事项
1、注意染液要现配现用。
2、注意切片要用超纯水水洗。
TRAP染色是用于检测骨组织、骨细胞中特征物质的染色,使破骨细胞呈红色,背景呈绿色或蓝色。抗酒石酸酸性磷酸酶(Trap)为破骨细胞的标志酶,特异地分布于破骨细胞中,为破骨细胞所特有,通常作为鉴别破骨细胞的重要标志物。
TRAP染色服务内容
1、石蜡切片4~5um，脱蜡至水洗；细胞爬片或者冰冻切片用80%酒精固定后蒸馏水水洗3次，每次3分钟。
2、配制六偶氮副品红溶液
3、配制孵育液：取1ml六偶氨副品红加到18ml醋酸盐溶中，再加入1ml紫酚ASBI磷酸盐溶液，再加酒石酸钾钠 282mg。调pH值5.0，过滤备用；
4、阴性对照孵育液：取1ml六偶氨副品红加到18ml醋酸盐溶中，再加酒石酸钾钠282mg。调pH值5.0，过滤备用
5、切片入37℃蒸馏水水洗30秒；
6、入孵育液37℃孵育50-60分钟；
7、去离子水水洗3分钟；8、入苏木素复染40秒；
9、自来水水洗10分钟返蓝；
10、甘油明胶封片
alp碱性磷酸酶染色服务原理
人血液和造血细胞的碱性磷酸酶pH值为9.4，主要见于中性粒细胞系的成熟阶段或晚幼粒细胞。在不同生理状态和病理状态中均有明显的改变，具有鉴别诊断意义。
方法
目前碱性磷酸酶染色法有改良Gomori法及偶氮偶联法 (Kaplow)。
改良Gomori法原理为： 细胞内碱性磷酸酶水解试剂中的甘油磷酸钠释放出无机磷酸盐，与钙离子作用生成磷酸钙，再与钴离子作用生成磷酸钴，后与硫化铵生成黑色硫化钴颗粒，沉淀于细胞浆中。
偶氮偶联法原理为：细胞中碱性磷酸酶在pH 9.5～9.8的缓冲液中，催化α-磷酸萘酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于细胞浆中。
结果解读
ALP活性仅见于成熟或接近成熟的中性粒细胞。计数100个中性粒细胞中阳性细胞数，称阳性率。还可按阳性细胞中的颗粒密度分为1～5级，指数各为1～5。计算100个中性粒细胞，将每个细胞的指数相加，其总和称阳性指数或积分，作为判断酶活性的半定量的指标。由于方法及条件的不同，正常差别很大，故每次检查时应作正常对照。本法的正常值阳性率为60～99%，阳性指数169～367，平均为274。
