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一步法miRNA反转录试剂盒
点击次数：36 发布时间：2022/7/7 15:00:46
由于miRNA(microRNA)分子序列较小，仅20nt左右，没有真核生物特有的Poly(A)尾巴结构，采用传统Oligo dT引物和随机引物很难获得从miRNA到cDNA的反转录产物。目普遍采用的解决方案有两种：特异性反转录引物（图1A所示）、两步加A法反转录方案（图1B所示）。
开发出一套较新的一步法miRNA反转录试剂盒，基于Peter改良的miR-Q技术，可以对成熟的miRNA同时完成Poly(A)反应和反转录反应，直接获得含有特异性tag和15(T)的cDNA产物（如图2所示）。该方法使得miRNA反转录与mRNA的反转录一样轻松,直接将提取的microRNA与反应缓冲液混合物混合并置于PCR仪上1小时即可获得高浓度的、包含所有miRNA分子的cDNA产物,获得的cDNA产物适合于采用SYBR Green染料法进行RealTime PCR进行定量检测。
由于miRNA(microRNA)分子序列较小，仅20nt左右，没有真核生物特有的Poly(A)尾巴结构，采用传统Oligo dT引物和随机引物很难获得从miRNA到cDNA的反转录产物。目普遍采用的解决方案有两种：特异性反转录引物（图1A所示）、两步加A法反转录方案（图1B所示）。
开发出一套较新的一步法miRNA反转录试剂盒，基于Peter改良的miR-Q技术，可以对成熟的miRNA同时完成Poly(A)反应和反转录反应，直接获得含有特异性tag和15(T)的cDNA产物（如图2所示）。该方法使得miRNA反转录与mRNA的反转录一样轻松,直接将提取的microRNA与反应缓冲液混合物混合并置于PCR仪上1小时即可获得高浓度的、包含所有miRNA分子的cDNA产物,获得的cDNA产物适合于采用SYBR Green染料法进行RealTime PCR进行定量检测。
原创作者：上海圻明生物科技有限公司
