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pCold-SUMO原核蛋白表达试剂盒
点击次数：41 发布时间：2022/7/15 15:54:10
本试剂盒所包含的原核表达载体(pCold-SUMO-10His)是在pCold-SUMO载体基础上改造而成，该载体启动子(CS Promoter)来源于南嗜冷细菌，在低温下(15度)才能启动蛋白的表达。低温下细菌生长缓慢，使得蛋白合成速度减慢，从而限度的提高了蛋白正确折叠的几率，提高了蛋白可溶性表达，增强了活性蛋白的表达比率。该表达系统所包含的SUMO tag可以大地提高小分子量蛋白的表达量，而且能进一步提高蛋白的可溶表达几率。另外，TEE信号肽可增强冷启动子调控下目的蛋白的高表达。
升后的pCold-SUMO-10His载体，其SUMO蛋白标签含有10个组氨酸标签（10His tag），使其结合Ni-NTA的能力更强。与较早版本的pCold-SUMO表达系统相比，pCold-SUMO-10His表达系统在保留了原有系统的蛋白可溶性生产能力、高特异性剪切能力的情况下，显著提高了与Ni-NTA的结合能力。通过与Ni-NTA结合能力的提高，在以下三个方面改善了生产重组蛋白的性能：（1）提高了粗蛋白样品中目标蛋白的捕获能力，从而提高纯化产量；（2）在蛋白纯化过程中可以使用更高浓度的咪唑进行漂洗，去杂蛋白的能力明显提升，从而获得更高纯度的重组蛋白；（3）在重组蛋白酶切去除SUMO标签后，利用Ni-NTA去除SUMO标签更为，获得纯度更高的无标签目标蛋白。
原创作者：上海圻明生物科技有限公司
