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虾碱性磷酸酶(SAP)
点击次数：62 发布时间：2022/7/15 16:17:40
虾碱性磷酸酶（Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)催化DNA和RNA 的5’和3’磷酸单脂的去磷酸化反应，也可水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。该酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除DNA和RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，载体经虾碱性磷酸酶去磷酸化后5’ 端无磷酸基团，因而不可以和自身3’ 端连接。虾碱性磷酸酶可作用于5’突出端、凹陷端和平末端，也可用来降解PCR反应中的游离dNTP，用于制备测序模板和SNP分析。该虾碱性磷酸酶在65℃温育5分钟即可的、不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之后，可以不用去除。基于以上特性，该酶是传统去磷酸化酶－－小牛肠碱性磷酸酶的绝佳替代物。
应用
DNA 和 RNA 的去磷酸化
防止克隆载体的自连
制备5´末端标记模板
去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
活性定义
1单位指在25℃条件下，30分钟能使1μg经 HindIII（产生5’突出末端）消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制＞95%的DNA 再连接。
储存
-20℃可保存3年。
原创作者：上海圻明生物科技有限公司
