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PCR血液基因组DNA直提试剂盒
点击次数：43 发布时间：2022/7/18 14:19:39
PCR血液基因组DNA直提试剂盒是用于快速获得全血或冻存血液DNA的试剂盒，整个过程只需15min。使用该快提试剂盒获得的基因组DNA可直接用于下游PCR或定量PCR扩增。因其操作简单，时间短等优点，使得该试剂盒尤其适用于临床检测试验和高通量血液样品的PCR检测。
应用
SNP基因分型和突变检测
DNA测序和克隆
转基因动物的靶基因检测
储存
若短期使用请置于4℃可放置6个月；若保存请置于-20℃，避免反复冻融，可保存五年。
操作方法
1.哺乳动物无核红细胞全血
（1）实验操作请将10X红细胞裂解液用无菌水稀释到1X，如1ml的10X红细胞裂解液中加入9ml无菌水。
（2）在1.5ml EP管中加入600μl的1X红细胞裂解液，向红细胞裂解液中加入100μl抗凝全血，上下颠倒混合均匀，室温放置2min，13000rpm离心2min，倒掉上层红色液体，留取底部白细胞层。
（3）再次加入400μl的1X红细胞裂解液，上下颠倒5~10次。13000rpm离心1min，倒掉上层红色液体，留取底部白细胞层。
（4）通常底部残留40μl液体，漩涡震荡(或枪头吹打)重悬白细胞层，至无块状物。加入20μl DA Blood Solution，漩涡5s混合均匀。并置于75°C水浴中放置10min。孵育完毕后加入10μl DB Blood Solution，漩涡5s混合均匀，即可用于下游PCR扩增。通常每50μl PCR体系加入1μl制备的该基因组DNA即可。
2.禽类有核红细胞全血
（1）直接取2.5μl抗凝禽血加入到47.5μl水中，漩涡5s混合均匀。
（2）加入20μl DA Blood Solution，漩涡5s混合均匀。并置于75°C水浴中放置10min。孵育完毕后加入10μl DB Blood Solution，漩涡5s混合均匀，即可用于下游PCR扩增。通常每50μl PCR体系加入1μl制备的该基因组DNA即可。
原创作者：上海圻明生物科技有限公司
