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磷酸二酯酶PDE IV底物 红色荧光
点击次数:53 发布时间:2022/7/19 16:24:38
磷酸二酯酶PDE IV底物 TAMRA-cAMP 红色荧光:这种红色的cAMP衍生物是磷酸二酯酶(PDE)IV的特定底物。它可用于检测PDE IV活性或与FRET读数或FP格式的抗cAMP抗体一起筛选PDE IV抑制剂。 PDE是一组降解第二种信使分子的酶:环状核苷酸cAMP和cGMP。它们调节亚细胞域内环状核苷酸信号传导的定位,持续时间和幅度。因此,PDE是这些第二信使分子介导的信号转导的重要调节剂。 PDE酶由于其独特的组织分布,结构和功能特性,经常成为药理抑制的靶标。 PDE抑制剂可通过抑制PDE的降解来延长或增强cAMP或cGMP介导的生理过程的作用。在诸如肺动脉高压,冠心病,痴呆,抑郁症和精神分裂症等域,PDE抑制剂被确定为新的潜在治疗剂。
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 FAM-cAMP PDE IV储备溶液(1 mM):
将500 µL DMSO加入0.5 umol FAM-cAMP PDE IV底物瓶中,制成1 mM储备液。
2.工作溶液
FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物测定溶液(2X):
通过将1 mM FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物储备溶液稀释到您的PDE缓冲液(例如10 mM Tris-HCl)中,制成2X FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物测定溶液 ,pH 7.4、10 mM的Mg Cl2、1 mM的MnCl2)制成200-400 nM的溶液。 注意:仅进行测定所需的足够数量。
样品操作及分析
1.将等体积的PDE IV标准品或样品与2X FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。
2.在Ex / Em = 490/525 nm处监测荧光偏振。
磷酸二酯酶PDE IV底物 TAMRA-cAMP 红色荧光:这种红色的cAMP衍生物是磷酸二酯酶(PDE)IV的特定底物。它可用于检测PDE IV活性或与FRET读数或FP格式的抗cAMP抗体一起筛选PDE IV抑制剂。 PDE是一组降解第二种信使分子的酶:环状核苷酸cAMP和cGMP。它们调节亚细胞域内环状核苷酸信号传导的定位,持续时间和幅度。因此,PDE是这些第二信使分子介导的信号转导的重要调节剂。 PDE酶由于其独特的组织分布,结构和功能特性,经常成为药理抑制的靶标。 PDE抑制剂可通过抑制PDE的降解来延长或增强cAMP或cGMP介导的生理过程的作用。在诸如肺动脉高压,冠心病,痴呆,抑郁症和精神分裂症等域,PDE抑制剂被确定为新的潜在治疗剂。
磷酸二酯酶PDE IV底物 TAMRA-cAMP 红色荧光:这种红色的cAMP衍生物是磷酸二酯酶(PDE)IV的特定底物。它可用于检测PDE IV活性或与FRET读数或FP格式的抗cAMP抗体一起筛选PDE IV抑制剂。 PDE是一组降解第二种信使分子的酶:环状核苷酸cAMP和cGMP。它们调节亚细胞域内环状核苷酸信号传导的定位,持续时间和幅度。因此,PDE是这些第二信使分子介导的信号转导的重要调节剂。 PDE酶由于其独特的组织分布,结构和功能特性,经常成为药理抑制的靶标。 PDE抑制剂可通过抑制PDE的降解来延长或增强cAMP或cGMP介导的生理过程的作用。在诸如肺动脉高压,冠心病,痴呆,抑郁症和精神分裂症等域,PDE抑制剂被确定为新的潜在治疗剂。
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 FAM-cAMP PDE IV储备溶液(1 mM):
将500 µL DMSO加入0.5 umol FAM-cAMP PDE IV底物瓶中,制成1 mM储备液。
2.工作溶液
FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物测定溶液(2X):
通过将1 mM FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物储备溶液稀释到您的PDE缓冲液(例如10 mM Tris-HCl)中,制成2X FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物测定溶液 ,pH 7.4、10 mM的Mg Cl2、1 mM的MnCl2)制成200-400 nM的溶液。 注意:仅进行测定所需的足够数量。
样品操作及分析
1.将等体积的PDE IV标准品或样品与2X FAM-Cyclic-3',5'-AMP PDE IV底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。
2.在Ex / Em = 490/525 nm处监测荧光偏振。
原创作者:上海圻明生物科技有限公司