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高铁还原酶(ferric-chelate reductase,FCR)试剂盒2022动态已更新《新品/推荐》

点击次数:65 发布时间:2022/9/27 9:31:15

高铁还原酶(ferric-chelate reductase,FCR)试剂盒
http://www.app17.com/c156980/products/d11269358.html

高铁还原酶(ferric-chelate reductase,FCR)试剂盒说明书

                                       分光光度法50/48

 

    意:正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

高铁还原酶(ferric-chelate reductase,FCR)催化高价铁螯合物中的Fe3+还原为Fe2+,在部分物种铁元素的吸收中有重要作用。


测定原理:

FCR催化Fe3+还原为Fe2+Fe2+ferrozine反应显色,在562nm下有特征吸光值。


自备用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。


试剂组成和配制:

试剂一:液体15mL×1瓶,4℃避光保存;

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存;

试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存。


粗酶液提取:

按照组织质量(g):水mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。


测定步骤:


FCR活性计算公式:

标准曲线:y = 8.0014x + 0.0011R2 = 0.9997

单位定义:每g样本每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。

FCRnmol/min/g 鲜重)=△A-0.0011÷ 8.0014×1000×V÷(V÷V样总×W)÷T

                       = 4.166×△A-0.0011÷W

单位定义:每mg蛋白每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。

FCRnmol/min/mg prot=△A-0.0011÷8.0014×1000×V÷(V÷V样总×Cpr)÷T

                        =4.166×△A-0.0011÷Cpr

 

V样总:加入提取液体积,1 mLV样:反应中样品体积,250μLV标:加入标准品体积 ,250μLT:反应时间,30minW:样品质量,gCpr:样本蛋白浓度,mg/mL1000μmolnmol的转换系数

 

 

原创作者:上海圻明生物科技有限公司

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