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技术文章
小鼠成纤维细胞PA317
点击次数:338 发布时间:2021/1/11 10:40:01
名称小鼠成纤维细胞PA317
别称 pA317
种属 小鼠
年龄(性别) 胚胎
组织来源 胚胎
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 成纤维细胞样
背景描述
PA317细胞源自TK-NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷
同转染构建而成。通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜
粒。PA317细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类,可能因为用于构建PA317细胞而转入的DNA丢
装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。在含0.03mM次黄嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM
基中短暂(大约5天)选择,可以选出保留了包装功能的细胞。选择后,PA317细胞应在HT培养基(0.03mM次黄嘌
0.02mM胸苷)中培养4天,以稀释残留的氨甲喋呤,此后PA317细胞不需选择可以稳定至少1个月。
生物安全等 1
生长培养基 DMEM(PM150210)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
名称小鼠成纤维细胞PA317
别称 pA317
种属 小鼠
年龄(性别) 胚胎
组织来源 胚胎
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 成纤维细胞样
背景描述
PA317细胞源自TK-NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷
同转染构建而成。通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜
粒。PA317细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类,可能因为用于构建PA317细胞而转入的DNA丢
装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。在含0.03mM次黄嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM
基中短暂(大约5天)选择,可以选出保留了包装功能的细胞。选择后,PA317细胞应在HT培养基(0.03mM次黄嘌
0.02mM胸苷)中培养4天,以稀释残留的氨甲喋呤,此后PA317细胞不需选择可以稳定至少1个月。
生物安全等 1
生长培养基 DMEM(PM150210)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
原创作者:上海圻明生物科技有限公司